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遺伝子(いでんし)を扱(あつか)う技術(ぎじゅつ)

カエル先生制限酵素(せいげんこうそ)で切(き)ってリガーゼでつなぐのが組換(くみか)え。PCRは倍々(ばいばい)ゲームで増(ふ)える計算(けいさん)が出(で)るよ。

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  1. **制限酵素(せいげんこうそ)**で切(き)ったDNA(新しいタブで開きます)断片(だんぺん)を**プラスミド**などの**ベクター**に組(く)み込(こ)み、**DNAリガーゼ**でつなぐことを**遺伝子組換(いでんしくみか)え**という。
  2. **PCR法(ほう)**は、温度(おんど)を上下(じょうげ)させるサイクルを繰(く)り返(かえ)し、特定(とくてい)のDNA領域(りょういき)を1サイクルごとに約(やく)2倍(ばい)ずつ増(ふ)やす技術(ぎじゅつ)だ。
  3. 増(ふ)やしたDNA断片(だんぺん)は**電気泳動(でんきえいどう)**で大(おお)きさごとに分離(ぶんり)して確認(かくにん)でき、遺伝子組換(いでんしくみか)え技術(ぎじゅつ)はインスリン(新しいタブで開きます)生産(せいさん)などに利用(りよう)されている。

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詳しく

制限酵素(せいげんこうそ)・DNAリガーゼとベクター・遺伝子組換(いでんしくみか)え

制限酵素(せいげんこうそ)は、DNAの特定(とくてい)の塩基(えんき)(新しいタブで開きます)配列(はいれつ)を認識(にんしき)して切断(せつだん)する酵素(こうそ)(新しいタブで開きます)で、細菌(さいきん)がもつものが利用(りよう)される。制限酵素(せいげんこうそ)で切(き)ったDNA断片(だんぺん)の切(き)れ目(め)どうしは、DNAリガーゼという酵素(こうそ)でつなぎ合(あ)わせることができる。

細胞(さいぼう)の外(そと)で取(と)り出(だ)したDNA断片(だんぺん)を、別(べつ)の生物(せいぶつ)の細胞(さいぼう)に導入(どうにゅう)して働(はたら)かせるには、運(はこ)び役(やく)となるベクターが使(つか)われる。ベクターの代表(だいひょう)例(れい)が、細菌(さいきん)の中(なか)で複製(ふくせい)される小(ちい)さな環状(かんじょう)DNAであるプラスミドだ。

目的(もくてき)のDNA断片(だんぺん)を制限酵素(せいげんこうそ)で切(き)り出(だ)し、同(おな)じ制限酵素(せいげんこうそ)で切(き)ったプラスミドにDNAリガーゼでつなぎ込(こ)み、細菌(さいきん)などの細胞(さいぼう)に導入(どうにゅう)してDNAをつなぎ直(なお)すことを遺伝子組換(いでんしくみか)えという。

制限酵素とDNAリガーゼによる遺伝子組換えAsatte Studio(Manazoo)/オリジナル(コードで作図)

PCR法(ほう)によるDNAの増幅(ぞうふく)

ごく少量(しょうりょう)のDNAから、特定(とくてい)の領域(りょういき)だけを多量(たりょう)に増(ふ)やす技術(ぎじゅつ)をPCR法(ほう)という。高温(こうおん)でDNAの2本鎖(ほんさ)を1本鎖(ほんさ)に分(わ)け、やや低(ひく)い温度(おんど)で増(ふ)やしたい領域(りょういき)の両端(りょうたん)にプライマーを結合(けつごう)させ、別(べつ)の温度(おんど)でDNAポリメラーゼを働(はたら)かせて新(あたら)しい鎖(くさり)を合成(ごうせい)する、という温度(おんど)のサイクルを繰(く)り返(かえ)す。

1サイクルごとに、増(ふ)やしたい領域(りょういき)を含(ふく)むDNAはおよそ2倍(ばい)に増(ふ)える。たとえば10サイクル繰(く)り返(かえ)すと、理論上(りろんじょう)は最大(さいだい)で2¹⁰=1024倍(ばい)、20サイクルなら2²⁰=約(やく)100万(まん)倍(ばい)にまで増(ふ)える。

このように、PCR法(ほう)は少量(しょうりょう)のDNAからでも、短時間(たんじかん)で大量(たいりょう)のDNA断片(だんぺん)を得(え)られる技術(ぎじゅつ)として、研究(けんきゅう)だけでなく検査(けんさ)などにも広(ひろ)く使(つか)われている。

PCR法によるDNAの倍々の増幅Asatte Studio(Manazoo)/オリジナル(コードで作図)

電気泳動(でんきえいどう)とインスリン生産(せいさん)などの利用(りよう)例(れい)

DNA断片(だんぺん)の大(おお)きさを確(たし)かめるには、電気泳動(でんきえいどう)がよく使(つか)われる。DNAは電圧(でんあつ)をかけたゲルの中(なか)で、小(ちい)さい断片(だんぺん)ほど速(はや)く、大(おお)きい断片(だんぺん)ほどゆっくり移動(いどう)するため、大(おお)きさごとにDNA断片(だんぺん)を分(わ)けて確認(かくにん)できる。

遺伝子組換(いでんしくみか)えの技術(ぎじゅつ)は、医薬品(いやくひん)の生産(せいさん)にも利用(りよう)されてきた。ヒトのインスリンの遺伝子(いでんし)を大腸菌(だいちょうきん)のプラスミドに組(く)み込(こ)み、大腸菌(だいちょうきん)にヒトのインスリンを作(つく)らせる方法(ほうほう)は、糖尿病(とうにょうびょう)の治療薬(ちりょうやく)の生産(せいさん)に使(つか)われている。

ほかにも、特定(とくてい)の遺伝子(いでんし)を体内(たいない)で働(はたら)かせる遺伝子(いでんし)治療(ちりょう)や、ゲノム(新しいタブで開きます)の特定(とくてい)の配列(はいれつ)を狙(ねら)って変(か)えるゲノム編集(へんしゅう)の技術(ぎじゅつ)が開発(かいはつ)され、医療(いりょう)や品種(ひんしゅ)改良(かいりょう)の分野(ぶんや)で応用(おうよう)が進(すす)められている。

確認問題

問題 1 / 4DNAの特定(とくてい)の塩基(えんき)配列(はいれつ)を認識(にんしき)して切断(せつだん)する酵素(こうそ)を何(なん)というか。

確認問題(解答用紙)

この問題を端末で解くための QR コード

スマホやタブレットで読み取ると、この問題をその場で解けます。

https://manazoo.com/science/genetic-engineering-techniques/?from=print#quiz

  1. DNAの特定(とくてい)の塩基(えんき)配列(はいれつ)を認識(にんしき)して切断(せつだん)する酵素(こうそ)を何(なん)というか。

    • ◯ RNAポリメラーゼ
    • ◯ DNAリガーゼ
    • ◯ DNAポリメラーゼ
    • ◯ 制限酵素(せいげんこうそ)

    正解:制限酵素
    制限酵素(せいげんこうそ)は、DNA(新しいタブで開きます)の特定(とくてい)の塩基(えんき)(新しいタブで開きます)配列(はいれつ)を認識(にんしき)して切断(せつだん)する酵素(こうそ)(新しいタブで開きます)で、細菌(さいきん)がもつものが利用(りよう)される。

  2. 遺伝子組換(いでんしくみか)えで、目的(もくてき)のDNA断片(だんぺん)を細菌(さいきん)の細胞(さいぼう)に導入(どうにゅう)するための運(はこ)び役(やく)として使(つか)われる、細菌(さいきん)がもつ小(ちい)さな環状(かんじょう)DNAを何(なん)というか。

    • ◯ プラスミド
    • ◯ ゲノム
    • ◯ リボソーム
    • ◯ ミトコンドリア

    正解:プラスミド
    ベクターの代表(だいひょう)例(れい)が、細菌(さいきん)の中(なか)で複製(ふくせい)される小(ちい)さな環状(かんじょう)DNAであるプラスミドで、制限酵素(せいげんこうそ)とDNAリガーゼを使(つか)って目的(もくてき)のDNAをつなぎ込(こ)む。

  3. PCR法(ほう)で、特定(とくてい)のDNA領域(りょういき)を10サイクル増幅(ぞうふく)したとき、理論上(りろんじょう)は最大(さいだい)で何倍(なんばい)に増(ふ)えるか。

    • ◯ 約(やく)10倍(ばい)
    • ◯ 約(やく)20倍(ばい)
    • ◯ 約(やく)1024倍(ばい)
    • ◯ 約(やく)100倍(ばい)

    正解:約1024倍
    PCR法(ほう)は1サイクルごとにおよそ2倍(ばい)に増(ふ)えるため、10サイクルでは理論上(りろんじょう)最大(さいだい)で2の10乗(じょう)=1024倍(ばい)になる。

  4. ヒトのインスリンの遺伝子(いでんし)を大腸菌(だいちょうきん)のプラスミドに組(く)み込(こ)み、大腸菌(だいちょうきん)にヒトのインスリンを作(つく)らせる技術(ぎじゅつ)は何(なに)の生産(せいさん)に使(つか)われているか。

    • ◯ 抗生(こうせい)物質(ぶっしつ)
    • ◯ ワクチンの保存(ほぞん)液(えき)
    • ◯ 消化酵素(しょうかこうそ)の洗剤(せんざい)
    • ◯ 糖尿病(とうにょうびょう)の治療薬(ちりょうやく)

    正解:糖尿病の治療薬
    ヒトのインスリン(新しいタブで開きます)遺伝子(いでんし)を大腸菌(だいちょうきん)のプラスミドに組(く)み込(こ)んで作(つく)らせる方法(ほうほう)は、糖尿病(とうにょうびょう)の治療薬(ちりょうやく)(インスリン製剤(せいざい))の生産(せいさん)に使(つか)われている。

単元のポイント

  • 制限酵素(せいげんこうそ)とDNAリガーゼ 特定(とくてい)の塩基(えんき)配列(はいれつ)を切(き)る制限酵素(せいげんこうそ)と、切(き)れたDNA断片(だんぺん)をつなぐDNAリガーゼ
  • ベクターとプラスミド・遺伝子組換(いでんしくみか)え DNA断片(だんぺん)を細胞(さいぼう)に導入(どうにゅう)する運(はこ)び役(やく)(ベクター)の代表(だいひょう)例(れい)(プラスミド)と、それを使(つか)ってDNAをつなぎ直(なお)す遺伝子組換(いでんしくみか)え
  • PCR法(ほう) 温度(おんど)を変(か)えるサイクルを繰(く)り返(かえ)し、特定(とくてい)のDNA領域(りょういき)を1サイクルごとに約(やく)2倍(ばい)ずつ増幅(ぞうふく)する技術(ぎじゅつ)
  • 電気泳動(でんきえいどう)と利用(りよう)例(れい) DNA断片(だんぺん)を大(おお)きさで分離(ぶんり)する電気泳動(でんきえいどう)と、インスリン生産(せいさん)・遺伝子(いでんし)治療(ちりょう)・ゲノム編集(へんしゅう)などの利用(りよう)例(れい)
問題を解く
単元のポイント
  • 制限酵素(せいげんこうそ)とDNAリガーゼ 特定(とくてい)の塩基(えんき)配列(はいれつ)を切(き)る制限酵素(せいげんこうそ)と、切(き)れたDNA断片(だんぺん)をつなぐDNAリガーゼ
  • ベクターとプラスミド・遺伝子組換(いでんしくみか)え DNA断片(だんぺん)を細胞(さいぼう)に導入(どうにゅう)する運(はこ)び役(やく)(ベクター)の代表(だいひょう)例(れい)(プラスミド)と、それを使(つか)ってDNAをつなぎ直(なお)す遺伝子組換(いでんしくみか)え
  • PCR法(ほう) 温度(おんど)を変(か)えるサイクルを繰(く)り返(かえ)し、特定(とくてい)のDNA領域(りょういき)を1サイクルごとに約(やく)2倍(ばい)ずつ増幅(ぞうふく)する技術(ぎじゅつ)
  • 電気泳動(でんきえいどう)と利用(りよう)例(れい) DNA断片(だんぺん)を大(おお)きさで分離(ぶんり)する電気泳動(でんきえいどう)と、インスリン生産(せいさん)・遺伝子(いでんし)治療(ちりょう)・ゲノム編集(へんしゅう)などの利用(りよう)例(れい)